不同單細胞全基因組擴增體系擴增牛微量血液DNA效果評價

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摘 要: 旨在通過二代測序技術評估不同單細胞全基因組擴增(single cell whole genome amplification, scWGA)體系對牛微量血液基因組DNA的擴增效果,建立微量DNA全基因組擴增體系。本研究分別采用MDA(multiple displacement amplification)和MALBAC(multiple annealing and looping-based amplification cycles)兩種scWGA體系對華西牛1 ng血液基因組DNA進行全基因組擴增,隨后基于兩種體系的擴增產(chǎn)物以及原始未稀釋血液DNA構建測序文庫,利用DNBSEQ-T7RS測序平臺進行全基因組測序(whole genome sequencing,WGS),通過比較擴增產(chǎn)物片段大小、濃度、總質量評估擴增效率,通過分析GC含量、測序覆蓋度、基因分型一致率、基因型檢出率等評估兩種體系的擴增效果。(剩余18648字)