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向日葵黑莖病菌RPA/CRISPR-CaS12a快速檢測(cè)方法的建立

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摘要向日葵黑莖病菌是向日葵上的一種毀滅性真菌,是我國(guó)的植物檢疫性有害生物。為了準(zhǔn)確快速檢測(cè)向日葵黑莖病菌,本研究根據(jù)向日葵黑莖病菌及其近似種的ITS序列差異,設(shè)計(jì)特異性RPA引物和CRISPR-Cas12acrRNA,建立了RPA等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)結(jié)合CRISPR-Cas12a檢測(cè)的快速檢測(cè)方法。通過(guò)條件優(yōu)化,RPA/CRISPR-Cas12a檢測(cè)體系在37℃恒溫條件下,RPA反應(yīng)30 min,CRISPR/Cas12a反應(yīng)20min,即可特異性檢測(cè)向日葵黑莖病菌。(剩余7416字)

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