基于TaqMan MGB探針的可可花癭病菌快速檢測方法

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摘要 可可花癭病菌是一種我國進(jìn)境植物檢疫性真菌。本文根據(jù)可可花癭病菌EF1α基因的保守序列，設(shè)計(jì)并合成1對特異性的實(shí)時(shí)熒光PCR引物和1條TaqMan MGB探針，建立了可可花癭病菌的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測方法。特異性試驗(yàn)結(jié)果表明，該檢測方法能夠特異性檢出可可花癭病菌;實(shí)時(shí)熒光PCR優(yōu)化反應(yīng)條件為引物終濃度0.2 μmol/L，探針終濃度0.6 μmol/L;靈敏度試驗(yàn)結(jié)果表明，20 μL反應(yīng)體系中可可花癭病菌DNA含量最低檢測限為10 pg;重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果表明，該檢測方法的重復(fù)性和穩(wěn)定性良好;接種試驗(yàn)樣品檢測結(jié)果表明，該方法可用于疑似攜帶可可花癭病菌樣品的檢測與初篩。（剩余10197字）