豬細(xì)小病毒VP2蛋白重組桿狀病毒的構(gòu)建表達(dá)與鑒定

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摘  要：為構(gòu)建一種能夠用于開(kāi)發(fā)豬細(xì)小病毒病毒樣顆粒疫苗的豬細(xì)小病毒VP2蛋白的重組桿狀病毒。根據(jù)GeneBank數(shù)據(jù)庫(kù)中的豬細(xì)小病毒全基因組序列設(shè)計(jì)并合成了１對(duì)能擴(kuò)增VP2基因的引物，采用PCR擴(kuò)增豬細(xì)小病毒BJ-2株的VP2基因，并將其克隆到桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體pFastBacH TA中，獲得陽(yáng)性質(zhì)粒pFastBac-PPV VP2；測(cè)序后將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞中，獲得含有VP2基因的重組桿狀病毒質(zhì)粒Bacmid-PPV VP2；最后將獲得的重組桿狀病毒質(zhì)粒Bacmid-PPV VP2轉(zhuǎn)染Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞，并成功拯救了能穩(wěn)定表達(dá)豬細(xì)小病毒VP2蛋白的重組桿狀病毒Bacmid-PPV VP2。（剩余6667字）